1 2 3 4 5 6 7 8 9
далее огической структуры эндометрия и очагов аденомиоза с предполагаемыми фазами менструального цикла. Гистологические срезы толщиной 4 мкм изготовляли из парафиновых блоков по обычной методике, фиксировали на стекла, предварительно покрытые адгезивом (APES-ацетон). В качестве первичных специфичных антител применяли моноклональные антитела к bcl-2 («DOKO», Германия), к c-myc («Novocastra», Германия), поликлональные кроличьи антитела к Ki-67 («DOKO», Германия), к bax («Calbiochem», Великобритания). В качестве вторичных антител использовали биотинилированные антикроличьи и антимышиные иммуноглобулины («Daкo», Германия), Для метки вторичных антител применяли авидин — биотиновый комплекс (АВС, KIT, «Dako»), для визуализации места связывания антигена с антителом использовали метку — фермент пероксидазу хрена в присутствии субстрата — пероксида водорода и колориметрического реактива 3,3-диаминобензидина (DAB, KIT, «Dako»). Результаты иммуногистохимической реакции оценивались для bcl-2 bax, c-myc в баллах полуколичественным методом по интенсивности коричневой окраски. Оценка интенсивности реакции осуществлялась по 6-балльной системе: 6 баллов 4 балла 2 балла 0 баллов +++ ++ + >20% клеток 10—20% клеток 5—10% клеток 0% клеток Эспрессию антигена Ki-67 оценивали путем подсчета процента окрашенных ядер на 300 клеток. через использование TUNEL-метода (terminal deoxyribonucleotidil tronsferase — mediated dUTP nickend labeling) мы получили реальное представление об интенсивности процессов апоптоза в ткани, а также выявили клетки, содержащие разрывы в ДНК. Иммуногистохимическую реакцию осуществляли путем присоединения меченого олигонуклеотида (Bio-16dUTP) на 3-ОН- конец ДНК через использование терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы при использовании ApopDETEK-теста (ENZO-CLUA, ApopDETEK Cell Death Assay System). Для визуализации реакции применяли метку — фермент пероксидазу хрена в присутствии субстрата — пероксида водорода и колориметрического реактива 3,3-диаминобензидина (Simply Sensitive Horsradish Peroxidase-DAB In Situ Detection System). В качестве контрастирующего вещества использовали гематоксилин, Результаты представляли в виде процента выявленных апоптозных телец на 3000 клеток.Статистическую обработку результатов осуществляли через использование программы Epi Info 5,0 (CDC; http://www.CDC.GOV) на персональном компьютере с вычислением среднего арифметического, стандартного отклонения, доверительного интервала, х-квадрата, критерия Стьюдента, доверительной вероятности р. Ретроспективная оценка клинических показателей в сопоставлении с результатами гистологического и иммуноморфологического исследований позволила выявить клинико-морфологические особенности 2 вариантов развития миомы матки — простой и пролиферирующей, сочетающихся с аденомиозом. Общими для них был схожий возраст больных, время выявления сочетанного заболевания, возраст наступления менархе, большое количество перенесенных детских инфекций. На каждую пациентку в обеих группах приходилось 1,1 родов и 2,8 аборта. Быстрота р далее ...