1 2 3 4 5 6
далее ли этот штамм генов всех трех токсинов (СТ, Zot, Асе), входящих в состав профага СТХ. Правомерность такого вопроса связана с существованием штаммов, несущих в хромосоме дефектный профаг СТХ, утративший гены ctxAB, но сохранивший гены zot и/или асе, кодирующие соответственно токсин зонального поглощения (Zot) и дополнительный холерный токсин (Асе) [4]. Результаты ПЦР-тестирования показали отсутствие не только генов ctxA, zot, асе, входящих в состав "кассеты вирулентности" профага СТХф, но и генаst, кодирующего биосинтез термостабильного токсина НАГ-вибрионов, в редких случаях встречающегося у штаммов V. cholerae биовара Эль-Тор [28]. Это означало, что указанные токсины не могли участвовать в развитии диареи у больного. Более того, хромосома была лишена гена tcpA, определяющего продукцию основной субъединицы пилей адгезии TCP — ключевого фактора колонизации, а также гена aldA, ответственного за продукцию альдолазы, и регуляторного toxT, входящего в состав острова патогенности VPI (от англ. V. cholerae pathogenicity island) [21]. Кроме того, у данного штамма не было и гена папН, локализованного на втором острове патогенности VIP-2 и кодирующего биосинтез нейраминидазы [19], а также гена rstC (табл. 2), транскрипционного активатора генов ctxAB, находящегося на другом профаге RS1 [15]. Идентичные результаты были получены и при ПЦР-анализе генома второго атипичного штамма М1411 (см. табл. 2). Анализ полученных данных свидетельствует о том, что хромосомы изучаемых штаммов были лишены всех известных ключевых генов вирулентности, расположенных на мобильных генетических элементах (МГЭ) — профагах и островах патогенности. В связи с полученной информацией появилась необходимость определить наличие в их геноме других, более стабильно наследуемых генов вирулентности, локализованных на основной части хромосомы, продукты которых также могут вносить определенный вклад в развитие инфекционного процесса. В результате было установлено, что в геноме штаммов Ml 333 и М1411 имеются следующие гены: rtxA, кодирующий биосинтез токсина RTX, hapA, определяющий продукцию растворимой гемагглютининпротеазы, одного из ферментов патогенности, и глобальный регуляторный ген toxR, контролирующий экспрессию 20 генов, включая и гены вирулентности [16, 18, 23]. Кроме того, присутствовала нуклеотидная последовательность attRS — сайт для внедрения в хромосому умеренных фагов СТХф и RS1()> [21]. К тому же в хромосомах обнаружен ген mshQ (см. табл. 1), локализованный на острове персистенции EPI (от англ. environmental persistence island) и детерминирующий продукцию маннозочувствительных пилей адгезии, через использование которых вибрионы прикрепляются к абиотическим поверхностям внешней среды, образуя бактериальные сообщества (биопленку), что способствует их выживанию в указанных условиях [20, 26].Анализ генотипических свойств штаммов М1333 и М1411 (ctxA", zor, асе", st", tcpA", toxT", aldA", rstC-, nanH", attRS^ toxR^ hapA-", rtxA-', mshQ"1') показал, что у них отсутствуют генетические маркеры эпи далее ...