|
1 2 3 4
далее -луночных плоскодонных планшетах «Linbro» в среде RPMI 1640 («Flow») с добавлением 300 мкг/мл глутамина («Flow»), 0,02 М HEPES («Serva»), 100 мкг/мл гентамицина («Фармахим») и 10% сыворотки эмбрионов телят («Sigma»). Культивирование осуществляли в СОд-инкубаторе в течение 4суток. Активацию клеток выполняли через использование фитогемагглютинина Р-ФГА («Difco») в концентрации 10 мкг/мл с первых дней кульгивирования клеточных элементов. На 4-е сутки культивирования клеточные элементы фиксировали 70% спиртом в течение часа, отмывали физиологическим раствором и окрашивали на ДНК в течение 15 минут 0,5% раствором йодида пропидия («Sigma») на физиологическом растворе, забуференном фосфатом (рН=7,4) и содержащем 0,1% тритона Х-100 и 0,1% цитрата натрия. Данные обработаны методами вариационной статистики через использование персонального компьютера IBMP и пакета прикладных программ Statgraph. Результаты и обсуждение. У больных ОВИН в периферической крови показатели апоптоза (Ml) и пролиферации (МЗ) лимфоцитов были выше, чем у доноров, но эти различия не были значимыми (р>0,05)(рис.1и 2). Выживаемость клеточных элементов у пациентов, страдающих ОВИН, в 1,8 раз ниже, чем у доноров (уровень апоптоза лимфоцитов при культивировании значительно выше - (р<0,05). Активация клеток поликлональным стимулятором ФГА вела к еще большему увеличению апоптоза (р<0,01), который в 2,1 раз превышает этот показатель у доноров. Культивирование и активация лимфоцитов существенно изменяют соотношение пролиферации и апоптоза как у доноров, так и у больных ОВИН, но апоптоз становится преобладающим, причем у доноров в 3,8 раз, при ОВИН - в 18,6 раз. Следовательно, лимфоциты периферической крови у больных ОВИН отличаются высокой чувствительностью к различным воздействиям, даже таким, как культивирование и активация, с преобладанием выбора клеткой пути апоптоза, т.е. гибели. Полученные данные о значительном повышении апоптоза в лимфоцитах периферической крови у больных ОВИН под влиянием активирующих воздействий стали основанием для использования нового иммуномодулятора полиоксидония в терапии этой патологии Полиоксидоний является полимерным физиологически активным соединением, обладающим высокой биодоступностью при разных путях введения, проникает через гематоэнцефалический и гематоофтальмический барьер. Одним из основных биологических свойств полиоксидония является его способность стимулировав антиинфекционную систему защиты организма. Уста-новлено, что полиоксидоний активирует все звенья фагоцитарного процесса. В условиях in vivo полиоксидоний проявляет способность активировать факторы иммунной системы. Помимо иммуномодулирующего, полиоксидоний обладает выраженным детоксицирующим, антиоксидантным и мембраностабилизирующим эффектом. Совокупность этих свойств позволяет эффективно использовать полиоксидоний в комплексном лечении и профилактике острых и хронических инфекционных заболеваний бактериальной, грибковой и вирусной этиологии [10, 11, 12, 13, 14]. В нашем исследовании полиоксидоний был применен п далее ...
|
