1 2 3 4 5
далее на могут определяться и за счет продуктов его протеолитического распада. Важно, что антиоксидантные свойства альбумина предопределяют его протекторный эффект в условиях стресса и патологии организма [II].
В клинике РНИОИ предложен и успешно используется метод введения химиопрепаратов на аутоплазме больных, при котором отмечается выраженный противоопухолевый эффект, сопровождаемый, однако, повышением общетоксических реакций. Известно, что альбумин обладает большой связывающей емкостью для лекарственных веществ, что существенно влияет на их фармакодинамику и фармакокинетику. В настоящей работе представлялось интересным изучить влияние химиопрепаратов на структурно-функциональное состояние альбу-миновой фракции плазмы крови больных раком молочной железы с целью выяснения некоторых механизмов действия новых видов химиотерапии, основанных на введении цитостатиков на аутосредах. Материалы и методика Материалом для исследования послужили сыворотка крови 20 больных раком молочной железы T2—4N1—2MO и выделенная из нее альбуминовая фракция. Сыворотку крови инкубировали в течение 60 мин с химиопрепаратами в концентрациях, достигаемых при их клиническом применении: циклофосфан — 3 мг/мл, адриабластин — 300 мкг/мл, метотрексат — 300 мкг/мл, винкристин — 10 мкг/мл. Фракцию альбумина выделяли методом ионообменной хроматографии [6] с использованием ДЭАЭ-целлюлозы DE-32. Разделение проводили на колонке диаметром 5 см и длиной 50 см. Профиль фракционирования компонентов сыворотки крови фиксировали путем определения оптической плотности поглощения при 280 нм при регистрации на «Увикорде» (Швеция). Перед фракционированием сыворотку крови диализовали против 0,01 М фосфатного буфера рН 7,2 в течение 16—18 ч. Идентификацию фракции осуществляли электр офоретически. В альбуминовой фракции, выделенной из плазмы крови больных раком молочной железы до и после инкубации плазмы с химиопрепаратами, исследовали супероксидустраняющую активность методом диск-электрофореза в полиакриламидном геле [8, 14]. Количество сульфгидрильных групп определяли по методу В.Ф.Фоломеева, а концентрацию молекул средней массы по методу А.Н.Ковалевского, О.Е.Нифаньева [5]. О количестве свободных NHi-rpynn судили по приросту ТХУ-растворимых фолинположительных продуктов. Была изучена также антиокислительная активность альбумина по его влиянию на спонтанное и Fe^-индуцированное образование малонового диальдегида. в модельной системе, содержащей 10% гомогенат ткани мозга интактных крыс [2]. С целью изучения природы свободных радикалов, образующихся в системе H2O2-Fe2 и установления действия альбумина как антиоксиданта в реакционную смесь вводились вещества — «ловушки» свободных радикалов: гистидин и маннитол. Результаты и обсуждение Установлено, что в альбумине, выделенном из плазмы крови больных раком молочной железы после ее инкубации со смесью химиопрепаратов, состоящей из доксорубицина, циклофосфана, метотрексата и винкристина, на 92,8% снижался уровень сульфгидрильных групп. После инкубации пла далее ...